五味子乙素对急性心肌梗死小鼠心肌结构和心功能的影响

摘要：目的 探讨五味子乙素对心肌梗死小鼠心肌结构和心功能的影响及其机制.方法 C57BL/6J雄性小鼠56只,由南京医科大学动物中心提供.采用随机数字表法将小鼠分为3组,即假手术组(n=8)、五味子乙素组(n=24)和心肌梗死组(n=24).采用冠状动脉结扎术建立小鼠心肌梗死模型,假手术组只开胸不结扎.术后五味子乙素组小鼠给予五味子乙素80 mg·kg-1 ·d-1灌胃治疗.术后3周观察各组小鼠存活率,通过二维超声心动图检测各组小鼠心功能指标,处死小鼠计算心脏质量/体重比,通过氯化三苯基四氮唑染剂(TTC)和伊文思蓝染色计算心肌梗死面积,制作心脏病理切片并行HE及Masson染色以观察小鼠心肌炎性浸润、结构及纤维化的情况,通过免疫荧光法检测小鼠缺血心肌组织细胞凋亡情况,通过酶联免疫吸附试验检测转化生长因子-β (TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)蛋白的表达水平,Western blot法检测核因子-κB (NF-κB)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关蛋白X(Bax)、Bcl-2、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、磷酸化eNOS(p-eNOS)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt (p-Akt)蛋白的表达水平.结果 术后3周,假手术组小鼠存活率为100％(8/8),五味子乙素组小鼠存活率为83.33％ (20/24),心肌梗死组小鼠存活率为54.17％(13/24),五味子乙素组小鼠存活率明显高于心肌梗死组(P＜0.05).五味子乙素组小鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD)均明显低于心肌梗死组[分别为(4.13±0.40) mm比(4.44±0.46) mm和(3.07±0.39) mm比(3.46±0.52) mm),P均＜0.05],左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)均明显高于心肌梗死组[(51.77±8.50)％比(40.23±8.30)％和(26.44±5.15)％比(19.53±4.56)％,P均＜0.05],心脏质量/体重比值明显低于心肌梗死组[(0.59±0.06)％比(0.68±0.10)％,P ＜0.05].五味子乙素组小鼠心肌梗死面积为(23.4 ±2.36)％明显小于心肌梗死组的(39.4±2.06)％(P＜0.05).HE染色结果显示心肌梗死组小鼠梗死边缘区域心肌大量炎性浸润,排列结构非常紊乱,而五味子乙素组小鼠心肌病变情况则明显轻于心肌梗死组.Masson染色结果显示,五味子乙素组心肌纤维化范围明显小于心肌梗死组、程度明显轻于心肌梗死组.心肌梗死组小鼠心肌细胞凋亡指数[(45.33±2.02)％]明显高于假手术组[(5.00±1.83)％](P＜0.05),而五味子乙素组小鼠心肌细胞凋亡指数[(26.00±2.73)％]则明显低于心肌梗死组(P＜0.05).五味子乙素组小鼠心肌组织抗凋亡蛋白Bcl-2明显高于心肌梗死组(P＜0.05),凋亡蛋白Bax则明显低于心肌梗死组(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值明显高于心肌梗死组(P＜0.05).心肌梗死组小鼠心肌组织NF-κB、TGF-β、TNF-α和IL-1β的表达水平均明显高于假手术组(P均＜0.05),而五味子乙素组上述炎症因子的表达水平均低于心肌梗死组(P均＜0.05).假手术组、五味子乙素组、心肌梗死组小鼠心肌组织中eNos、Akt的表达差异均无统计学意义(P均＞0.05).而五味子乙素组小鼠心肌组织p-eNOS和p-Akt的表达水平均明显高于心肌梗死组(P均＜0.05).结论 五味子乙素具有改善梗死后心肌重构及心功能的作用,而其机制可能与其抗纤维化、抗炎、抗细胞凋亡和增强修复的作用有关.