Salubrinal通过抑制内质网应激诱发的细胞凋亡改善心力衰竭大鼠心功能

摘要：目的 探讨特异性真核翻译起始因子2α(eIF2α)去磷酸化抑制剂Salubrinal (Sal)对缺血诱发的心力衰竭(心衰)大鼠心功能的影响及其机制.方法 8周龄雄性Sprague-Dawley(SD)清洁级大鼠,经冠状动脉结扎建立心肌梗死引起的心衰模型,然后对大鼠称重并进行编号,根据随机数字表分为4组,即假手术组(n=12)、心衰组(n=10)、溶剂对照组(DMSO组,n=12)和Sal处理组(Sal组,n=12).分别于术后30 min和8周采用超声心动图检测各组大鼠心功能指标,术后30 min超声心动图检查示左心室短轴缩短率(LVFS) ＜30％标志模型建立成功.8周末处死大鼠后测定左心室质量指数,采用Annexin Ⅴ-PI染色流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,分别采用免疫组织化学法和实时逆转录聚合酶链反应检测心肌细胞内质网应激标志蛋白和mRNA的表达水平.结果 (1)各组大鼠心功能的检测结果:药物干预8周后,心衰组大鼠左心室收缩末期内径(LVESD)和左心室舒张末期内径(LVEDD)均明显高于假手术组(P分别为0.032和0.021),左心室射血分数(LVEF)明显低于假手术组(P=0.028).Sal组大鼠LVESD和LVEDD均明显低于心衰组和DMSO组(P分别为0.031和0.035),LVEF则明显高于心衰组和DMSO组(P分别为0.029和0.036).(2)各组大鼠左心室质量指数的检测结果:药物干预8周后,心衰组大鼠左心室质量指数明显大于假手术组[(2.30 ±0.40) mg/g比(1.78 ±0.31) mg/g,P＜0.05],Sal组则明显小于心衰组和DMSO组[(1.88±0.25) mg/g比(2.30±0.40)和(2.25±0.36) mg/g,P均＜0.05].(3)各组大鼠心肌细胞凋亡的检测结果:药物干预8周后,心衰组大鼠心肌细胞凋亡率明显高于假手术组[(32.8±3.9)％比(5.5±0.6)％,P=0.041],Sal组明显低于心衰组和DMSO组[(10.3±1.2)％比(32.8±3.9)％和(30.4±3.1)％,P分别为0.029和0.045].(4)各组大鼠心肌组织中内质网应激相关蛋白表达的检测结果:药物干预8周后,心衰组大鼠心肌细胞中B型利钠肽(BNP)、钙网蛋白(CRT)、磷酸化eIF2α(p-eIF2α)和半胱氨酸蛋白酶12(caspase-12)的蛋白表达水平均明显高于假手术组(P均＜0.05),Sal组均明显低于心衰组和DMSO组(P均＜0.05).(5)各组大鼠心肌组织中内质网应激相关蛋白mRNA表达水平的检测结果:药物干预8周后,心衰组大鼠心肌细胞中BNP、CRT和caspase-12的mRNA表达水平均明显高于假手术组(P均＜0.05),Sal组均明显低于心衰组和DMSO组(P均＜0.05).结论 Sal可通过抑制内质网应激反应介导的凋亡信号通路分子caspase-12的表达抑制心肌细胞凋亡,从而改善心衰大鼠的心功能.