番茄红素可改善血管紧张素Ⅱ诱导的H9c2细胞氧化应激

摘要：目的 观察番茄红素(lycopene,Lyc)对血管紧张素Ⅱ(angiotensionⅡ,AngⅡ)诱导的H9c2细胞氧化应激的影响,并探讨其机制.方法 本研究为细胞实验,采用的是大鼠H9c2细胞系.实验将H9c2细胞分为6组,分别为空白对照组(对照组)、单加AngⅡ组(1.μmol/L)(AngⅡ组)、AngⅡ(1μmol/L) +Lyc (3.125 nmol/L)组(AngⅡ+低剂量Lyc组)、AngⅡ(1μmol/L)+Lyc(6.25nmol/L)组(AngⅡ+中剂量Lyc组)、AngⅡ(1μmol/L)+Lyc(12.5 nmol/L)组(AngⅡ+高剂量Lyc组)和单加Lyc(12.5 nnmol/L)组(Lyc组).采用不同因素干预H9c2细胞12h后,细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)检测不同浓度Lyc和(或)AngⅡ对H9c2活性的影响,酶标仪及荧光显微镜检测Lyc对AngⅡ诱导细胞产生活性氧(ROS)的影响,实时荧光定量聚合酶链反应检测Lyc对AngⅡ诱导的细胞内还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶2(NOX2)、NADPH氧化酶p47 phox亚基(p47phox)、超氧化物歧化酶1(SODl)及超氧化物歧化酶2(SOD2)基因表达的影响,细胞丙二醛(MDA)检测试剂盒检测MDA的变化.结果 (1)各组H9c2细胞活力的检测结果:AngⅡ组细胞生存率明显低于对照组(P＜0.01).而AngⅡ+低剂量Lyc组、AngⅡ+中剂量Lyc组和AngⅡ+高剂量Lyc组H9c2细胞生存率均明显高于AngⅡ组(P均＜0.01),且呈浓度依赖性.(2)各组H9c2细胞中ROS表达水平的检测结果:AngⅡ组H9c2细胞中ROS表达水平明显高于对照组(P＜0.01).而AngⅡ+低剂量Lyc组、AngⅡ+中剂量Lyc组和AngⅡ+高剂量Lyc组H9c2细胞中ROS表达水平均明显低于AngⅡ组(P均＜0.01),且呈浓度依赖性.(3)各组H9c2细胞中SOD1、SOD2 mRNA表达水平及MDA含量的检测结果:AngⅡ组H9c2细胞中SOD1、SOD2 mRNA水平均明显低于对照组,而MDA含量明显高于对照组(P均＜0.01).而AngⅡ+低剂量Lyc组、AngⅡ+中剂量Lyc组和AngⅡ+高剂量Lyc组H9c2细胞中SOD1、SOD2 mRNA水平均明显高于AngⅡ组,MDA含量则均低于AngⅡ组(P均＜0.01),且均呈浓度依赖性.(4)各组H9c2细胞中NOX2蛋白及其亚单位p47phox mRNA表达水平的检测结果:AngⅡ组H9c2细胞中NOX2蛋白表达水平及其亚单位p47 phox的mRNA水平均明显高于对照组(P均＜0.01),而AngⅡ+低剂量Lyc组、AngⅡ+中剂量Lyc组和AngⅡ+高剂量Lyc组二者的表达水平均明显低于AngⅡ组(P均＜0.01),且呈浓度依赖性.结论 Lyc可改善AngⅡ诱导的H9c2细胞氧化应激,其机制与Lyc可抑制AngⅡ诱导的H9c2细胞中ROS的生成,同时可促进细胞ROS的清除能力有关.